Что такое цитология у собак
Цитология животных
Цитология у животных — это метод морфологической диагностики, основанный на изучении микроскопическим методом клеток организма. В большинстве случаев цитологические исследования помогают определить наличие или отсутствие злокачественных образований, характер опухолевого процесса. Но также путем цитологических исследований можно оценить характер патологического процесса, оценить состояние внутренних органов, исследовать естественные физиологические и аномальные жидкости.
Когда применяется цитология
Какую информацию может дать цитология
Цитология — это наука о клетке. При любом цитологическом исследовании мы можем видеть в микроскоп клетки исследуемой жидкости или мазка.
При цитологии крови можно увидеть в ней опухолевые клетки (при некоторых видах онкологии), можно обнаружить кровепаразитов (бабезии, дирофилярии). Даже входящая в большинстве случаев в обычный клинический анализ крови лейкограмма — это по сути своей цитология мазка крови, в котором подсчитывается количество разных клеток крови, что позволяет определить, есть ли в организме воспалительный процесс, заподозрить нарушение работы органов кроветворения, наличие аутоимунных реакций.
При проведении цитологии мочи можно получить информацию о количестве и типу мочевых кристаллов, которые образуют уролиты. Также в моче могут встречаться клетки эпителия мочевыводящих путей или даже почек, что говорит о необходимости дальнейшей диагностики мочевыделительной системы.
При проведении цитологии выпотов можно узнать, является ли он стерильным или там есть бактерии, могут быть опухолевые клетки — все это позволяет поставить диагноз или определить направление дальнейшей диагностики питомца.
Цитология может браться и с поверхности кожи — часто дерматологи делают мазки-отпечатки и смотрят, какие клетки там обнаруживаются, нет ли накожных и внутрикожных паразитов. При диагностике отитов мазок проводится обязательно — отит может быть бактериальной природы, вызываться грибком (обычно такие отиты вторичны) или начинаться из-за воздействия паразитов (например, отодексов).
Какая информация поможет ветеринару в лечении
Цитология — один из очень важных методов диагностики. В зависимости от того, есть ли в крови бабезии, или нет, будет приниматься решение о терапии пироплазмоза и использовании препарата против этого вида паразитов. Если при исследовании мазка из уха у собаки не было обнаружено клещей — значит, причина отита в чем-то другом, лечение будет требоваться иное, и так далее.
Если жидкость, взятая из организма, стерильна — это подтверждает один диагноз, если в ней обнаружатся бактерии — это будет другой диагноз и другая схема лечения животного.
Как берется проба клеток
В зависимости от объекта, цитология которого проводится, будет выбираться и способ взятия пробы клеток. Для цитологии с кожи чаще всего используется мазок-отпечаток или скотч-тест. Могут браться более глубокие соскобы. Для сбора материала для цитологии влагалищного мазка может использовать обычная ватная палочка.
Кровь на мазок чаще всего берется из периферических капиллярных сосудов, например, из уха, венозная кровь здесь не нужна.
При необходимости взять образец клеток для цитологии новообразования оптимально использовать тонкоигольную биопсию — этот метод является малоинвазивным, практически не травмирует исследуемый орган и окружающие ткани.
При взятии выпота чаще всего диагностическую процедуру совмещают с лечебной — проводится аспирация жидкости, и оттуда уже берется проба для проведении цитологии.
Какие есть преимущества у цитологии
Цитология достаточно быстрый в исполнении метод диагностики (в отличие, например, от гистологии). Она позволяет максимально быстро получить информацию, важную для назначения лечения.
В большинстве случаев для взятия проб клеток нет необходимости в седации животного, каких-то особых методах фиксации — мазок-отпечаток или взятие крови из уха практически безболезненны. Тонкоигольня биопсия может проводиться под седацией, чтобы обеспечить неподвижность пациента. Такое исследование чаще всего проводится под визуальным контролем — при помощи датчика УЗИ или эндоскопа, в некоторых случаях область взятия пробы локализуется при помощи рентгена.
В некоторых случаях без проведения цитологии корректное назначение дальнейшего лечения невозможно.
Какие ограничения есть у цитологии
Ограничения в проведении цитологии в основном касаются диагностики новообразований. Объем клеток, берущихся для цитологии, невелик, возможны случаи, когда опухолевые клетки могут туда просто не попасть или не получится получить полную картину, определить конкретный тип новообразования.
Так как цитология малоинвазивна, противопоказаний немного, однако если у животного есть нарушения свертываемости крови, а врачу необходимо провести биопсию опухоли печени или почек — процедуру рекомендуется проводить в операционной под контролем хирурга, чтобы при необходимости остановить кровотечение. В абсолютном большинстве случаев тонкая игла не будет вызывать кровотечений.
Какой этап следует после цитологии
При диагностике опухолей после хирургического удаления новообразования и цитологии должна проводиться гистология. В некоторых случаях при обнаружении злокачественных опухолей может потребоваться иммуногистохимия для подбора наиболее подходящей химиотерапии.
Для всех других видов цитологии после проведения анализа подтверждается диагноз или направление для дальнейшей диагностики, и назначается лечение.
(с) Ветеринарный центр лечения и реабилитации животных «Зоостатус».
Варшавское шоссе, 125 стр.1. тел. 8 (499) 372-27-37
Цитологическое и гистологическое исследование
Для постановки онкологического диагноза зачастую пользуются всеми возможными методами обследования пациента (осмотр онкологом, УЗИ, рентген, КТ/МРТ). Однако особую роль играет цитологические и гистологические пробы. Микроскопия клеток и тканей, полученных при биопсии позволяет подтвердить или опровергнуть не только наличие опухолевого процесса, но также обнаружить признаки воспалительных и специфических неопухолевых изменений, что позволит разработать план дальнейшей диагностики и лечения пациента.
Цитология у животных сегодня – один из основных методов точной постановки диагноза.
Главными преимуществами цитологического исследования являются:
Естественно, как и у любого другого метода диагностики, здесь есть и свои недостатки. К ним относятся:
Гистология животных
Несмотря на то, что гистология животных является более точной для диагностики опухолевых образований, он имеет существенный недостаток, такой как длительность выполнения.
Связано это с тем, что материал для гистологического анализа должен пройти дополнительную подготовку – фиксацию, изготовление парафинового блока, нарезку с помощью специального аппарата – микротома, а также окрашивание. В связи с этим, ожидать результата придется от 7 до 16 дней, в зависимости от лаборатории. Дольше всего приходится ждать результатов исследования биоптатов из костей – до 3-4 недель, так как материал предварительно проходит еще одну обработку – декальцинацию.
Собак
Гистология собаке используется для изучения различных опухолей и новообразований. С помощью точного анализа тканей удается определить их происхождений и точно поставить диагноз.
Забора материала происходит хирургическим путем, например, после операций по удалению новообразований для определения их характера.
Кошек
Гистология кошек иногда оказывается недостаточно для постановки диагноза или определения точной стадии процесса.
Это связано с тем, что некоторые опухоли имеют схожее строение ткани, но отличаются между собой биологическим поведением (например, гастроинтестинальная стромальная и лейомиосаркома желудка). Также затруднение с определением вида опухоли может возникать при крайней степени их злокачественности, когда клетки ткани становятся совершенно непохожими на нормальную ткань-предшественницу. В таком случае может потребоваться дополнительная диагностика – иммунофенотипирование.
Цитология животных
Для цитологической пробы могут быть взяты различные мазки (влагалищный, из уха или с поверхности кожи, мазки-отпечатки с поверхности тела), пунктаты, полученные при проведении тонкоигольной биопсии, а также физиологические и патологические жидкости организма (кровь, моча, желчь, содержимое кист.).
Собак
Цитология у собак представляет собой процесс забора клеток организма для более подробного изучения. Эта процедура проходит практически безболезненно, с использованием обычной иглы для биопсии. После этого анализ отправляется на в лабораторию.
Кошек
Цитология кошек, как других питомцев, не всегда позволяет получить точную информацию о природе заболевания.
Если цитологическое исследование по каким-либо причинам не дает нам точного ответа о наличии или отсутствии онкологического процесса, необходимо прибегать к следующему виду морфологического обследования – гистологическому. Оно представляет собой изучение фрагмента ткани пациента, полученного с помощью биопсии или в процессе оперативного вмешательства.
Стоимость услуг
Услуга
Стоимость, руб.
Описание
ХИМИОТЕРАПИЯ – 1 СЕАНС
Включает расчет разовой дозы препаратов, приготовление растворов химиотерапевтических препаратов, введение препаратов в мочевой пузырь.
Не включает стоимость расходных материалов и препаратов.
Включает расчет разовой дозы препаратов, приготовление растворов химиотерапевтических препаратов, введение препаратов в грудную полость.
Не включает стоимость расходных материалов и препаратов.
Включает расчет разовой дозы препаратов, приготовление растворов химиотерапевтических препаратов, внутривенное системное струйное введение химиотерапевтических препаратов.
Не включает стоимость расходных материалов и препаратов.
Включает расчет разовой дозы препаратов, приготовление растворов химиотерапевтических препаратов для инфузии, проведение инфузии. Контроль за состоянием пациента во время манипуляции.
Не включает стоимость расходных материалов и препаратов.
Включает расчет разовой дозы препаратов, пероральную дачу химиопрепарата.
Не включает стоимость расходных материалов и препаратов.
Включает расчет разовой дозы препаратов, приготовление растворов химиотерапевтических препаратов, подкожное или внутримышечное введение химиотерапевтических препаратов.
Не включает стоимость расходных материалов и препаратов.
КРИОДИСТРУКЦИЯ – УДАЛЕНИЕ НОВООБРАЗОВАНИЯ С ПРИМЕНЕНИЕМ ЖИДКОГО АЗОТА
Включает проведение трех циклов замораживания-оттаивания одного новообразования диаметром до 0,5 см.
Не включает стоимость анестезии, расходных материалов и препаратов.
Включает проведение трех циклов замораживания-оттаивания одного новообразования до 1 см.
Не включает стоимость анестезии, расходных материалов и препаратов.
Включает проведение трех циклов замораживания-оттаивания одного новообразования от 1 до 3 см.
Не включает стоимость анестезии, расходных материалов и препаратов.
Включает проведение трех циклов замораживания-оттаивания одного новообразования от 3 до 5 см.
Не включает стоимость анестезии, расходных материалов и препаратов.
Включает проведение трех циклов замораживания-оттаивания одного новообразования от 5 до 7 см.
Не включает стоимость анестезии, расходных материалов и препаратов.
Цитология и гистология. В чем разница?
Цитология
Цитология (греч. κύτος «клетка» и λόγος — «учение», «наука») — раздел биологии, изучающий живые клетки, их органеллы,строение и функционирование, процессы клеточного размножения, старения и смерти.
Цитологические исследования в лаборатории проводят каждый день. Самыми простым примером может служить общий клинический анализ крови. Врач-лаборант ежедневно проводит исследования большого количества мазков крови, подсчитывает популяцию клеток, дифференцирует их и указывает на нарушение строения, в случае если таковые имеются.
То есть цитологическое исследование подразумевает под собой исследование клеток под микроскопом на предмет их строения и изменений.
Когда же еще можно использовать данный метод?
Чаще всего цитологией пользуются дерматологи и онкологи.
Дерматологам данное исследование позволяет оценить тип и интенсивность воспаления, обсеменение микрофлорой или грибами. Чаще всего цитологическое исследование врач проводит прямо на приеме, чтобы назначить корректное лечение вашему питомцу.
А вот в случае подозрения на новообразование у питомца сложнее. Врач на приеме может взять тонкоигольную биопсию. А врач-лаборант окрасит полученный материал специальными красителями для качественного исследования. Цитолог в свою очередь будет тщательно оценивать изменения в клетках, определять наличие или отсутствие воспаления, микрофлоры, грибов.
Так же цитологически исследуют выпоты в брюшную или грудную полости, синовиальную жидкость, ликвор и многое другое.
Преимущества цитологии:
Гистология
Гистология (от греч. ἱστός «ткань» + λόγος «знание, слово, наука») — раздел биологии, изучающий строение, жизнедеятельность и развитие тканей живых организмов
Гистология изучает ткани, которые в свою очередь состоят из клеток. То есть изменения рассматривают в более крупном объеме.
Для проведения гистологического исследования необходимо получить образец ткани (кусочек кожи, кусочек кости и т.п.). Материал специально готовится перед тем, как гистолог будет его исследовать. Этот процесс может занимать от 3 до 10 дней. Далее врач будет оценивать строение и изменения в ткани.
Зачем же гистология:
Таким образом, для корректного лечения вашего питомца важны как цитология, так и гистология.
Здоровья вам и вашим питомцам!
Лаборатория МВЦ «ПиК»
Цитологическая диагностика в ветеринарии
В настоящее время метод цитологической диагностики в ветеринарии, имеет такое же важное значение, как и в медицине, применяемый для постановки диагноза при различных образованиях.
Цитологическая диагностика — метод распознавания под микроскопом клеток организма, самостоятельно отторгшихся от тканей или искусственно разобщенных с ними, взятых из патологического очага, для предположения, либо постановки диагноза.
Основное назначение цитологического метода — получить ответ на вопрос о наличии или отсутствии злокачественного новообразования. В процессе дифференциальной диагностики определяется характер патологического процесса и устанавливаются воспалительные, реактивные, пролиферативные или предраковые поражения, а также доброкачественные опухоли.
Цитологическая диагностика имеет множество достоинств. Микроскопическое исследование цитологических образцов представляет ценный, простой, практичный тест, выполняемый в быстрые сроки.
Постановка диагноза на ранних стадиях развития опухоли, позволяет раньше начать специфическое лечение.
Данное исследование иногда может предотвратить хирургическое вмешательство при постановке таких диагнозов как липома и инклюзивная киста. При сильной васкуляризации опухоли, либо ее высокой инвазивности, помимо гистологического исследования нужно проводить и цитологическое исследование.
Цитологического исследования не всегда достаточно для постановки диагноза, во многих случаях понадобится и гистологическая диагностика, но в свою очередь с помощью цитологии можно поставить такие окончательные диагнозы как опухоли тучных клеток, трансмиссивная венерическая саркома, лимфосаркома, липома и др.
При постановке диагноза круглоклеточных опухолей, цитологическое исследование иногда бывает более информативным.
Как же происходит само исследование, и что для этого нужно?
Для самого исследования нужно получить клетки того патологического места, которое нас интересует.
Для этого производится забор материала одним из нескольких способов, в большей степени выбор метода зависит от места возникновении образования.
Один из наиболее часто используемых методов забора материала, является биопсия. Она бывает, как аспирационная, так и капиллярная. Для забора материала из внутренних органов данная манипуляция происходит под контролем УЗИ. Главное преимущество этого метода состоит в том, что при заборе материала происходит наименьшая инвазивность, и вызывается минимальный стресс у животных, так же в некоторых случаях может проводиться без применения анестезии и хирургического вмешательства.
Основными недостатками данного исследования при биопсии является обсеменение патологическим материалом окружающих тканей, например, если забор был произведен в некротизированном месте, либо в участке с сильным воспалением, так же может быть распространение метастазов по организму, но приживаемость их низка из-за клеточной резистентности. Так же есть риск развития кровотечения.
Следующий метод забора материала для цитологического исследования является взятие мазка отпечатка либо с поверхности кожи, либо с патологического очага во время хирургической операции.
Метод соскоба применяется как для кожных образований, так и для фиброзных тканей.
Далее полученные клетки равномерно распределяют на предметное стекло, фиксируют, окрашивают, и затем врач-цитолог уже проводит исследование. Если полученные препараты информативны, и материала достаточно для исследования, врач пишет заключение. В некоторых случаях требуется гистологическое подтверждение диагноза.
Эпителиальные (карциномы) и мезенхимальные (саркомы) опухоли идентифицировать цитологически труднее, чем круглоклеточные и дифференциально-клеточные образования, и поставить специфический диагноз на основании цитологических данных не всегда возможно. Задача в данном случаи состоит в том, чтобы дифференцировать злокачественные образования от доброкачественных.
Показания для проведения цитологического исследования:
Также читайте:
Клинический анализ крови — анализ, позволяющий оценить содержание гемоглобина в системе красной крови, количество эритроцитов, цветовой показатель, количество лейкоцитов, тромбоцитов. Клинический анализ крови позволяет рассмотреть лейкограмму и скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Существуют определенные нормы содержания тех или иных компонентов в…
В нашей ветеринарной клинике проводятся различные эндоскопические исследования: бронхоскопия, ларингоскопия, колоноскопия, эзофагогастроскопия. Бронхоскопия – метод осмотра трахеи и бронхов при помощи гибкого или жесткого эндоскопа. Ларингоскопия – метод исследования гортани при помощи специальных инструментов. Данные процедуры применяется для диагностики патологических …
1.Голодная диета При проведении планового рентгенологического обследования брюшной полости пациент по возможности не должен принимать пищу в течение 12-24 ч. За 4 ч до съемки не рекомендуется поить животное. По возможности (если это не угрожает жизни пациента) следует воздержаться от…
Видео
Кожные соскобы, трихоскопия, цитология и гистология кожи. Как достичь успеха в диагностике?
Большинство болезней кожи имеют сходную клиническую картину, однако можно выделить девять основных групп характерных дерматологических нарушений:
Как только врач-клиницист начнет относить каждого пациента к какой-либо из перечисленных выше категорий, ему станет намного проще формировать список дифференциальных диагнозов и разрабатывать диагностический план. Необходимо помнить, что у пациента могут быть сопутствующие болезни в настоящий момент времени, которые затрудняют постановку основного диагноза.
Быстрая постановка диагноза часто представляет значительные трудности для практикующего врача, поэтому далее речь пойдёт о доступных методах лабораторного исследования, требующих минимальных затрат времени и средств. Наиболее простые и быстрые диагностические тесты, используемые на практике:
– Вычёсывание гребнем или щёткой
– Исследование на дерматофиты
Кожные соскобы
Данное исследование должно проводиться во всех случаях! Для проведения кожных соскобов необходимо следующее оборудование и материалы: минеральное масло, предметные стёкла, лезвие скальпеля или шпатель (кюретка), микроскоп.
Предпочтительно сначала подстричь шерсть с выбранных участков кожи перед взятием соскоба. Для получения поверхностного соскоба достаточно поскоблить кожу лезвием скальпеля или шпателем, смоченным минеральным маслом. Для получения глубокого соскоба материал соскабливается до появления капель капиллярной крови. Материал наносится на предметное стекло с каплей минерального масла, накрывается покровным и исследуется под микроскопом (сначала под объективом 4х, затем 20х). Важно проводить соскоб с периферии максимально свежих очагов поражения. Необходимо тщательно исследовать все поля зрения препарата, причём успех обнаружения паразитов больше зависит от качества получения материала и выбора места для соскоба, чем от количества стёкол. Артефактами могут быть пузырьки воздуха в масле, чешуйки эпидермиса, их необходимо дифференцировать от клещей.
Вычёсывание гребнем /щёткой и осмотр материала
Позволяет обнаружить некоторых паразитов (блох, хейлетиелл) и возбудителей дерматофитоза. Для этого необходимы следующие материалы: частый гребень или щётка/зубная щётка, белая фильтровальная бумага, в некоторых случаях питательная среда для дерматофитов.
Техника проста: вычесанная шерсть помещается на влажную фильтровальную бумагу, при наличии экскрементов блох легко обнаруживаются красно-коричневые точки на белой бумаге. Хейлетиелл и других поверхностных паразитов можно увидеть при малом увеличении микроскопа (объектив 4х) или при помощи лупы. Метод Макензи (Mackenzie) предполагает вычёсывание шерсти при помощи зубной щётки для дальнейшего культивирования дерматофитов на селективных питательных средах.
Обследование на дерматофитозы
Исследование в лучах лампы Вуда – крайне неспецифично, однако при выявлении флюоресценции, пораженные волоски выщипываются и подвергаются дальнейшему исследованию (микроскопии после обработки препарата раствором щёлочи, посев для выявления культуры дерматофитов). На предметное стекло наносят 10% раствор КОН, размещают удалённую шерсть, нагревают над пламенем, проводят микроскопию, предварительно накрыв покровным стеклом, сначала под малым увеличением (объектив 10х), затем под большим (объектив 40х). Для лучшей визуализации можно использовать окраску хлорлактофенолом.
Скотч-тест
Данный тест позволяет обнаружить хейлетиелл и других паразитов, а в некоторых случаях может использоваться для проведения цитологического исследования. Для этого теста необходим обычный канцелярский скотч и «быстрые» краски (например, Дифф-Квик).
Для обнаружения паразитов необходимо предварительно взъерошить шерсть животного, затем быстро многократно прижать полоску скотча к шерсти животного, двигая её в направлении от хвоста к голове (против роста шерсти). Далее полоску скотча приклеивают к предметному стеклу и исследуют под малым увеличением микроскопа (объектив 4х). Таким образом, можно обнаружить возбудителей педикулёза (у собак – кусающая вошь Trichodectes canis, сосущая вощь – Linognatus setusus, у кошек Felicola subrostrata), хейлетиеллёза – Cheyletiella spp.и др.
Трихоскопия
Трихоскопия – исследование волос. При помощи трихоскопии можно диагностировать ряд болезней фолликулов и волос, провести оценку содержимого воронки фолликула, идентифицировать паразитов, выяснить причины алопеции. Материал получают путём удаления хирургическим зажимом 50-100 шерстинок. При одномоментном удалении не более 30 волос эта процедура вполне безболезненно переносится собакой. Выщипанные волосы размещают на предметном стекле, предварительно добавив минеральное масло. Препарат накрывают покровным стеклом.
Трихоскопия может оказаться полезной при диагностике некоторых паразитарных болезней, например, позволяет дифференцировать педикулёз и хейлетиеллёз (гниды вшей плотно прикреплены к волосу, а яйца хейлетиелл лежат свободно). Трихоскопия материала, полученного из межпальцевых зон, может помочь при диагностике пододемодекоза.
При микроскопии обращают внимание на структуру и пигментацию стержней волос, осматривают кончики волос, оценивают трихограмму (соотношение волос в разных фазах цикла фолликула: анаген/телоген). Анаген – стадия роста, корень удалённого волоса мягкий, приобретают округлую форму («ручки от зонта»). Катаген – промежуточная стадия, рост волоса прекращается, корень имеет форму кисти, окруженной стекловидной оболочкой. Телоген – стадия покоя волосяного фолликула, корень волоса теряет пигмент, сужается к концу в форме «художественной кисти», приобретает вид «копья». Различают первичные и вторичные волосы (в норме). Утрата первичных волос может быть одним из диагностических критериев при некоторых алопециях (например, при алопеции Х). Стержни первичных волос большего диаметра, мозговое вещество всегда толще коркового. Вторичные волосы меньшего диаметра, часто волнистые, мозговое вещество тоньше коркового.
Наличие всех 100% волос в стадии телогена в большинстве случаев не является нормой, может быть обусловлено неправильным взятием пробы, гормональными нарушениями, алопецией Х, телогеновой алопецией. Гормональные факторы оказывают влияние на цикл волосяного фолликула и сопровождаются телогенизацией, из-за задержки в цикле волосяного фолликула волосы постепенно подвергаются процессу старения (чёрная шерсть приобретает красноватый оттенок, рыжая – обесцвечивается, кончики могут расщепляться). Первичный волос исчезает, задержавшийся подшерсток имеет вид щенячьей шерсти. Эндокринными причинами таких алопеций могут быть гипотиреоз, гиперэстрогенизм, гиперкортицизм. Неэндокринной причиной является синхронизация всех волос в телогене, вызванная тяжёлой болезнью или стрессом. Как только волос возобновляет свой рост, через 1-2 месяца наступает ремиссия. Алопеция Х является болезнью с невыясненной до конца этиологией.
Структурные нарушения корней волос возникают вследствие фолликулярной дистрофии или дисплазии. В редких случаях это может быть связано с повреждением гранулами пигмента. Также корни волос повреждаются при очаговой алопеции и воздействии цитотоксических лекарств (редко).
Обращают внимание на кончики волос: в норме они имеют заострённую форму, а при алопеции вследствие вылизывания наблюдаются признаки травматизации кончиков волос (они могут быть обломанными). Кончики волос могут повреждаться из-за повышенной хрупкости, вызванной структурными изменениями. Например, отмечено появление раздвоенных кончиков волос при трихофитозе у гольден-ретриверов. Патологические изменения кончиков волос могут быть следствием чрезвычайно агрессивного мытья и расчёсывания шерсти, а также механического повреждения в местах повышенного трения.
При оценке стержня волоса можно обнаружить споры дерматофитов. При правильном выполнении трихоскопия даёт положительный результат в 60-70% случаев дерматофитоза. Предпочтительнее исследовать волосы, флюоресцирующие в лучах лампы Вуда. Структура стержня волоса нарушается не только при дерматофитозе, но и в ряде других случаев, например, химиотерапии (редко), механической и химической травме (агрессивный уход), недостатке питательных веществ, наследственных болезнях (узловой трихорексис и др.). Характерные изменения структуры стержня волоса наблюдаются при медуллярной трихомаляции немецких овчарок, проявляющейся у взрослых собак. Шерсть выглядит подстриженной на теле, хвосте, плече-лопаточной области. При трихоскопии в стержнях волос наблюдаются продольные трещины, разрывы. Характерные изменения отмечаются при алопециях, связанных с нарушением продукции меланина – алопеции «ослабленного» окраса и фолликулярной дисплазии чёрных волос. «Обесцвечивающей алопеции» подвержены собаки с голубым и светло-коричневым окрасами. При данной болезни в волосе с ослабленным цветом обнаруживаются крупные гранулы пигмента, которые вызывают повышенную ломкость волоса, что приводит к алопеции. Фолликулярная дисплазия чёрных волос наблюдается у двух- и трёхцветных собак, при этом поражаются только фолликулы чёрных волос. Щенки рождаются нормальными, но впоследствии зоны тёмных волос постепенно подвергаются алопеции. При трихоскопии выявляются аномальные глыбки меланина в стержне волоса.
При трихоскопии можно легко обнаружить агрегаты кератина в виде слепков волосяных фолликулов на стержне волос. Они возникают вследствие дефектов кератинизации (первичная себорея кокер-спаниелей, дерматоз при недостатке витамина А, аденит сальных желёз, лейшманиоз, демодекоз), а также при других фолликулярных болезнях, например, бактериальном фолликулите.
Цитология кожи
Цитология кожи – быстрый, неинвазивный метод, имеющий большую диагностическую ценность. Данный вид исследования особенно ценен для диагностики нодулярных, экссудативных, гнойничковых поражений, при образовании корок и себорее, а также при отитах. При нодулярных поражениях предпочтительнее получение материала путём тонкоигольной аспирации при помощи шприца объёмом 10 мл с иглами 21G, 24G. При мокнущих поражениях можно проводить исследование мазков-отпечатков. Также цитологическому исследованию подвергают скотч-препараты, и, конечно, глубокие соскобы. Препараты высушивают на воздухе, можно использовать фиксацию метанолом. Я использую модифицированный краситель Райта (Diff-Qick), в лабораториях также проводят окраску специальными красителями, иммуноцитохимию. Просмотр препаратов проводят последовательно с использованием объективов 4х, 10х, 40х, 100х (с иммерсионным маслом).
В соскобе с нормальной кожи преобладают корнеоциты, присутствуют также другие кератиноциты, единичные фибробласты. При цитологическом исследовании материала с воспалённых участков обращают внимание на следующие клетки:
– Нейтрофилы (дегенеративные и недегенеративные);
– Эозинофилы и тучные клетки;
– Акантолитические клетки (округлённые кератиноциты, лишённые отростков);
Я использую следующие основные критерии цитологической дифференциальной диагностики:
– Бактерии и эпителиальные клетки – бактериальный перерост;
– Дегенеративные нейтрофилы и бактерии – пиодермия;
– Недегенеративные нейтрофилы в большом количестве + акантолитические клетки – листовидная пузырчатка, эритематозная пузырчатка и др. (дополнительно + гистопатология);
– Нейтрофилы + макрофаги – пиогранулёма/гранулёма (грибковая, атипичная бактериальная инфекция);
– Лимфоциты, плазматические клетки – хроническое воспаление, плазмацитарный пододерматит, лимфома (дополнительно + лимфобласты);
– Эозинофилы в большом количестве – фурункулёз, назальный эозинофильный фурункулёз, пузырчатка, стерильная эозинофильная гранулёма, мастоцитомы (+тучные клетки), эозинофильный комплекс (у кошек), паразитарные узелки;
– Malassezia sp. и эпителиальные клетки – малассезиозный дерматит.
При оценке морфологии клеток принято оценивать следующие признаки злокачественности:
– Цитоплазматические критерии (анизоцитоз, макроцитоз, разная интенсивность окраски (степень базофилии), атипичные включения /вакуолизация, отсутствие специфичных гранул, большое ядерно-цитоплазматическое соотношение, а также наличие в препарате клеток, значительно различающихся по этому параметру);
– Ядерные критерии (анизокариоз, макрокариоз, изменение формы ядер, разреженный хроматин или гиперхромазия, анизохромазия, высокий митотический индекс, неправильные митозы, множественные ядрышки, гигантские ядрышки, патологическая форма ядрышек).
При исследовании цитологических препаратов нодулярных поражений надо ответить на следующие вопросы:
– Происхождение ткани: эпителиальные, мезенхимальные, гемопоэтические (круглоклеточные) опухоли.
Наиболее частыми цитологическими дифференциальными диагнозами опухолевых поражений кожи в практике являются:
– Эпителиальные опухоли (кератоакантома, плоскоклеточный рак и другие);
– Мезенхимальные опухоли (фибросаркома, меланома и др.);
– Круглоклеточные опухоли (мастоцитома, гистиоцитома, лимфома);
В связи с ростом доступности гистопатологии в последние годы значительно выросла возможность диагностики различных дерматологических патологий. Несмотря на это, пока достаточно редко прибегают к взятию гистобиоптатов ввиду возможности получения малоинформативных результатов. Поэтому дальнейшая информация посвящается оценке необходимости взятия гистобиопсии кожи, правильному выбору участка кожи для гистологического исследования, корректному забору образца, выбору патогистолога и интерпретации гистологического заключения. Только при соблюдении всех этих условий, можно получить точный диагноз.
Специальность «дерматогистопатолог» появилась почти 30 лет назад, когда раздел «Дерматопатология» был включён в «Руководство по дерматологии мелких животных» (под редакцией Muller, Kirk, Scott) в 1983 году. Позже вышли в свет ещё два специальных руководства, т.е. «Ветеринарная дерматопатология» (в редакции Gross, Ihrke, Walder) в 1992 (позже переизданное с дополнениями в 2005 под названием «Болезни кожи у собак и кошек» в редакции Gross, Ihrke, Walder, Affolter) и «Дерматопатология опухолей кожи» (Yager, Wilcock, 1994). Эти пособия очень уважаемы, ими руководствуются не только дерматогистопатологи, но и другие специалисты и практикующие врачи. В общем, эти книги способствовали появлению такой узкой специализации как дерматопатология. В целом, дерматопатологи подразделяются на две группы: патологоанатомы, которые испытывают интерес к дерматологии и клинические дерматологи, занимающиеся оценкой гистобиоптатов кожи. Достичь хороших результатов могут специалисты обеих групп. Не важно, в каком порядке были получены навыки оценки гистопатологии кожи, значение имеет опыт работы именно с образцами биоптатов кожи животных. По этой причине использование заключений гистологической лаборатории общего профиля или даже исследования дерматогистопатолога, но работающего с образцами кожи человека, легко может ввести врача в заблуждение, хотя в описании препарата и будут использованы специальные «страшные» термины. Иными словами, опытный дерматопатолог способен принести значимую пользу клиницисту, а неспециалист может только запутать клинициста. Поэтому дерматопатология не может являться безоговорочным диагностическим методом и должна рассматриваться исключительно как часть общего диагностического процесса. Ещё одной огромной проблемой является нарушение техники отбора образцов кожи. Несмотря на простоту этой процедуры, зачастую клиницист не знает, как получить гистобиоптат кожи правильно. Поэтому я хочу поделиться своим опытом, чтобы клинические дерматологи могли получать информативные результаты гистобиопсии кожи. Прошу обратить внимание на следующие моменты:
1) Гистобиопсия обычно не применяется для диагностики у собак с хроническим зудом. В большинстве случаев, результаты биопсии не дадут той информации, которую может получить специалист-дерматолог при клиническом обследовании.
2) Гистобиопсия кожи может быть полезна в следующих случаях:
– Алопеция, когда не удается поставить диагноз с использованием «быстрых» методов диагностики (т.е трихоскопии, кожных соскобов, цитологии…)
– Шелушение, когда не удается поставить диагноз с использованием «быстрых» тестов
– Пятна, папулы, вскрывающиеся пустулы, когда не удается поставить диагноз с использованием «быстрых» тестов
– Незаживающие эрозии, язвы, свищи
– Длительно существующие узлы, уплотнения, опухоли
– Депигментация и необычная гиперпигментация
– Подозрение на аутоиммунные болезни
– Подозрение на болезни кожи, при которых подтверждение диагноза возможно только гистологически (например, аденит сальных желёз)
– Случаи, когда подозревается опасный для жизни диагноз (дерматомиозит и др.)
– Случаи, когда отсутствует ответ на вполне рациональное лечение
Как получить качественные гистобиоптаты кожи
Чтобы получить понятный правильный гистологический диагноз, следует выполнять следующие действия:
1) Выбор участка для биопсии
Необходимо представить патологу соответствующие образцы, поэтому клиницист должен уделить внимание выбору нужного участка кожи. В большинстве случаев, для более вероятного получения правильного диагноза необходимо взять как минимум 3-5 образцов кожи от одного пациента. Выбор места для биопсии зависит от типа обнаруженных поражений:
– Алопеция: биоптаты должны быть получены с участка полностью облысевшей кожи (желательно 2), на границе нормальной кожи и области алопеции (1) и с кожи, покрытой нормальной шерстью (если такой имеется), чтобы патолог мог сопоставить физиологические волосяные фолликулы и фолликулы из области патологического процесса данного пациента.
– Шелушащиеся поражения («себорейная» кожа): берётся 2-3 биоптата с поражённого участка и образец нормальной кожи (1), чтобы была возможность сравнить эпидермис, особенно роговой слой в этих участках. Можно использовать биопсийную иглу для получения образцов.
– Макулы, папулы, пустулы: в результате биопсии должны быть получены образцы как минимум с трёх участков первичных поражений, которые должны располагаться в центре биоптата. Можно использовать биопсийную иглу для получения образцов.
– Изъязвлённые участки: это наиболее сложный для биопсии тип поражений. Основной ошибкой является направление патологу биоптата из центра язвы с последующим получением ответа «язва» без какого-либо специфического диагноза. В ситуации, когда материал получен из центра большой язвы, гистологическая картина будет характерна для инфекционного процесса. Приходится также брать несколько образцов, чтобы патолог мог связать процессы, происходящие в язве, и в нормальной коже. Если присутствуют небольшие язвы, можно отправить на исследование всю эту зону целиком, включая ободок здоровой ткани.
– Свищи: обычно патологический процесс расположен глубоко в дерме, а зачастую и под кожей, поэтому нужна очень глубокая биопсия для выяснения природы патологического процесса. В таких случаях лезвием скальпеля проводят иссечение клиновидного биоптата, с помощью биопсийной иглы при таком типе поражений невозможно получить информативный образец. В то же время, имеет смысл биопсийный материал направить на бактериологическое, микологическое исследование.
– Уплотнения и узлы: опять хирургическая эксцизия всего узла с прилегающими нормальными тканями является методом выбора. Согласно установленным правилам, эта процедура может проводиться только после исключения мастоцитомы путем проведения тонкоигольной аспирации и цитологического исследования.
– Депигментация: гистобиоптаты получают с полностью депигментированных участков (минимум 2), с пограничной зоны между нормальной и лишенной пигмента кожи (1), а также один образец с нормальной кожи.
2) Интерпретация гистологического заключения
Обычно дерматогистопатолог выдаёт заключение, которое должно содержать следующие разделы:
1. Описание образца тканей
2. Морфологический диагноз
3. Этиологический диагноз (при возможности определения причины)
Гистологическое описание представляет собой информацию, которую видит патолог в препаратах. Гистологическое описание содержит ценную информацию с использованием множества терминов, что имеет огромное значение в диагностике. Однако требуется значительный опыт для объяснения этих увиденных изменений, поэтому клиницисту не всегда стоит доверять интерпретации заключения патолога. Знание базовой терминологии крайне необходимо для корректной интерпретации заключений лаборатории. К сожалению, большинство клиницистов вообще не читают описательную часть.
Морфологический диагноз представляет собой краткое изложение патологических изменений в гистологическом образце в одном предложении (что-то подобное: выраженная гиперплазия с образованием корок и периваскулярной эозинофильной инфильтрацией с чесоточными клещами в роговом слое). Морфологический диагноз основывается на терминах, использованных в описании гистопатологического образца.
Этиологический диагноз возможен, когда гистопатология специфична для какой-либо болезни. Например, в описанном выше случае, этиологический диагноз – «саркоптоз». Если этиологический диагноз установить не представляется возможным, патолог предлагает список дифференциальных диагнозов и, возможно, рекомендации по дальнейшей диагностике.
Клиницист никогда не должен вслепую полагаться на заключение, очень важно, чтобы врач связывал воедино клиническую картину и гистопатологическую информацию. Существует большое число болезней, диагноз которых может быть установлен гистологически, но многие из них можно подозревать по характерным признакам.
Наиболее частые гистопатологические заключения будут приведены ниже.
Эпидермальные нарушения
1. Гиперкератоз и паракератоз. Гиперкератоз – неспецифическое изменение, может наблюдаться при многих хронических дерматозах, таких как паразитозы, аллергии, бактериальные и дрожжевые инфекции, нарушения кератинизации, некоторые иммуноопосредованные болезни и эндокринные нарушения. Паракератоз более специфичен, он выражен при дерматите, вызванном Malassezia; дерматите, отвечающем на терапию препаратами цинка; гепато-кожном синдроме и летальном дерматите бультерьеров.
2. Гиперплазия – это неспецифический ответ эпидермиса на хроническое воспаление или травму, наблюдается при многих воспалительных процессах, сопровождающихся зудом.
3. Субкорнеальные и интраэпидермальные пустулы – как правило, встречаются при поверхностной пиодермии, а также при листовидной пузырчатке и некоторых редких стерильных пустулярных болезнях.
4. Субэпидермальные пустулы и везикулы – это очень редкий признак, встречается при наследственных и аутоиммунных болезнях, например, при обыкновенной пузырчатке.
5. Некрозы и язвы – обычно наблюдаются при ожогах, контактном дерматите, пиотравматическом дерматите («горячие пятна»), синдроме зуда в области головы и шеи у кошек, эозинофильном комплексе у кошек. Более редкими причинами является гепато-кожный синдром, мультиформная эритема/ токсический эпидермальный некролиз, некоторые лекарственные реакции, вирусные болезни кошек (вирус коровьей оспы, герпес-вирус), тимома у кошек. Язвы могут быть вторичными поражениями вследствие серьёзных болезней кожи, таких как васкулит.
Поражения дермы
1. Поверхностные поражения дермы – достаточно редки, могут наблюдаться при пиодермии кожно-слизистых зон, волчанке, мультиформной эритеме, эпителиотропной лимфоме, тимоме (у кошек), дерматомиозите.
3. Фолликулит/фурункулёз – в большинстве случаев указывает на поражение кожи инфекционной природы, вызванное, например, стафилококками, дерматофитами или демодексами. Другими причинами могут быть эозинофильный фурункулёз, листовидная пузырчатка, эпителиотропная лимфома.
4. Нодулярный и диффузный дерматит – может быть следствием инфекционных и неинфекционных причин. Также кожная неоплазия может быть представлена как узелками, так и диффузными поражениями. Эти поражения включают в себя инфекционные процессы, которые могут быть вызваны глубокой стафилококковой инфекцией, актиномикозом, актинобациллёзом, нокардиозом, микобактериальной и глубокой грибковой инфекцией. Неинфекционными причинами могут быть реакции на инородные тела, паразитарные укусы, комплекс эозинофильных гранулём, синдром стерильной пиогранулёмы, гистиоцитоз, ювенильный целлюлит, аденит сальных желёз, плазмацитарный пододерматит, кожная лимфома.
5. Панникулит – этот признак можно наблюдать при глубоких подкожных бактериальных, микобактериальных и грибковых инфекциях, при стерильном нодулярном, идиопатическом панникулите, панстеатите, волчанке, также при местной реакции на инъекции, травмы. Может быть следствием панкреатита.
7. Атрофия – наблюдается при эндокринных болезнях, некоторых специфических алопециях, таких как сезонная алопеция боковой поверхности тела, паранеопластический синдром и ишемическая дерматопатия.
Подводя итог, можно сказать, что если у животных с признаками алопеции, шелушением и корочками, макулами, папулами, пустулами мне не удаётся установить диагноз путём проведения всех вышеперечисленных быстрых тестов, я прибегаю к проведению гистобиопсии. Нужно помнить, что в ряде случаев гистологическое исследование малоинформативно (например, у животных с хроническим зудом), поэтому хочу отметить крайнюю важность быстрых тестов у этих пациентов, а также необходимость клинической оценки и тщательного анализа анамнестических данных ветеринарным специалистом.
Литература
1. Cowell R.L., Tyler R.D., Meinkoth J.H., DeNicola D.B. Diagnostic Cytology and Hematology of the Dog and Cat, 3rd ed., Mosby Elsevier, 2008.
2. Raskin R.E., Meyer D.J. Canine and Feline Cytology, Saunders Elsevier, 2nd ed., 2010.
3. Mc. Cullough S., Brinson J. Clinical Techniques in Small Animal Practice, Vol.14, No.4, November, 1999.